TaqMan-MGB实时荧光PCR法检测太白贝母及其近缘种的研究

作者:张田; 陈娇; 蒋瑞平; 邹萌; 仰铁锤; 付绍兵; 周嘉裕*; 廖海*
来源:药学学报, 2021, 56(09): 2577-2583.
DOI:10.16438/j.0513-4870.2021-0230

摘要

采用TaqMan-MGB探针实时荧光PCR方法对太白贝母及其近缘种进行分子鉴定研究。提取太白贝母及其近缘种的DNA,依据ITS1区序列,利用MEGA7.0软件进行比较分析,找出太白贝母及其近缘种的变异位点,通过Primer Premier 6.0软件设计一对特异性引物和TaqMan-MGB探针。在Roche LightCycler 96系统中,该方法对太白贝母DNA模板的检测下限为0.002 39 ng·μL-1,最适Tm值区间为60与61℃。特异性鉴定研究表明,该方法对太白贝母有良好的特异性,能与暗紫贝母等其余13种不同贝母基原植物明显区分。TaqMan-MGB实时荧光PCR方法可实现对太白贝母及其近缘种的准确鉴定,为太白贝母资源的合理开发、中药材市场的管理和中药生产企业的原料监管提供技术支撑。

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