焦磷酸测序检测载脂蛋白E基因多态性方法的建立

作者：初亚男; 封利颖; 吴燕子; 张婕妤^*

来源：医学研究生学报, 2019, 32(05): 490-494.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2019.05.008

• 焦磷酸测序
• 载脂蛋白E
• rs7412
• rs429358

目的载脂蛋白E主要参与脂类代谢和胆固醇转运,对维持身体健康有重要意义。建立载脂蛋白E基因112T>C和158C>T单核苷酸多态性的焦磷酸测序方法。方法选择T、L、TT 3种扩增体系分别用60℃退火程序和62-68℃梯度升温退火程序,进行PCR体系和温度的优化考察。将焦磷酸测序结果与Sanger测序结果比较,考察方法的特异性,通过梯度稀释人基因组核酸作为检测模板,考察方法的灵敏度。结果根据产物浓度和特异性确定60℃循环程序和L体系为最优条件。20份标本的焦磷酸测序结果与Sanger测序完全一致。灵敏度可达0.16 ng基因组DNA。结论建立了ApoE基因中112和158位点的焦测序检测方法,可用于临床个体化用药指导。

• 单位
  南京军区南京总医院