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摘要
本试验旨在制备兔抗鸡toll样受体7(chicken toll-like receptor 7, chTLR7)多克隆抗体，根据GenBank已发表的chTLR7序列设计引物，采用RT-PCR方法扩增chTLR7胞外区基因片段，并构建原核表达重组质粒，通过优化蛋白表达条件，用获得的融合蛋白免疫兔制备多克隆抗体，通过免疫印迹及间接免疫荧光试验鉴定制备的兔抗chTLR7多克隆抗体的特异性。结果显示，该片段长度为1 122 bp，与预测的片段大小、碱基序列一致。构建的原核表达重组质粒pGEX-6P-1-chTLR7经IPTG诱导后，表达出预期63 kDa的重组蛋白，免疫兔可产生特异性抗体。制备的兔抗chTLR7多克隆抗体具有良好的特异性，为后续实验研究chTLR7传导通路、免疫机制等相关研究提供有利工具。
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