维生素D对PCOS大鼠颗粒细胞凋亡的影响

作者：孙婷; 马思琪; 郜艳翠; 刘远航; 李琳; 曲银娥^*

来源：中国现代医生, 2023, 61(05): 68-74.

• 维生素D
• 多囊卵巢综合征
• 颗粒细胞
• 凋亡
• PI3K/AKT/mTOR

目的 探讨维生素D(vitamin D,VD)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞(granulosa cells,GCs)凋亡的影响。方法 选取3周龄SD雌性大鼠21只，采用随机数字表法分为对照组(n=6)和造模组(n=15)，建立PCOS大鼠模型。造模组采用来曲唑[1mg/(kg·d)，溶于0.5%羧甲纤维素钠溶液]灌胃联合高脂饲料喂养，对照组采用等量的0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃，给予普通饲料喂养，将12只造模成功的大鼠(3只造模失败)，采用随机数字表法分为PCOS组(n=6)和PCOS+VD组(n=6)，两组灌胃同等剂量玉米油，普通饲料喂养，连续21d。比较对照组、PCOS组和PCOS+VD组大鼠的动情周期、卵巢形态学变化，以及血清25羟维生素D[25 hydroxyvitam D,25-(OH)D]、睾酮(testosterone,T)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)水平。造模结束后，分离GCs进行体外培养，根据培养方式分为GCs对照组(n=6)、GCs-PCOS组(n=6)、GCs-(PCOS+VD)组(n=6)、GCs-(PCOS+VD+LY294002)组(n=6)。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率，透射电镜观察细胞凋亡小体，蛋白免疫印迹法检测各组细胞中Bax、Bcl-2、PI3K、p-PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达。结果 与对照组比较，PCOS组大鼠血清中T、LH水平升高，FSH、25-(OH)D水平降低，动情周期紊乱，卵巢呈多囊样改变，差异均有统计学意义(P<0.05)；与PCOS组比较，PCOS+VD组大鼠血清T、LH降低，FSH及25-(OH)D水平升高，动情周期恢复正常，囊状卵泡数量减少，差异均有统计学意义(P<0.05)。与GCs对照组比较，GCs-PCOS组GCs凋亡率及Bax蛋白表达增加，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达减少，差异均有统计学意义(P<0.05)；与GCs-PCOS组比较，GCs-(PCOS+VD)组的GCs凋亡率及Bax蛋白表达降低，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达增加，差异均有统计学意义(P<0.05)；与GCs-(PCOS+VD)组比较，GCs-(PCOS+VD+LY294002)组的p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 VD可能通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制GCs凋亡。

• 单位
  基础医学院; 华北理工大学