地高辛标记的cDNA探针检测烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒及马铃薯Y病毒

作者：杜国英; 王锡锋; 周广和

来源：植物病理学报, 2004, (01): 75-79.

DOI：10.13926/j.cnki.apps.2004.01.013

• TMV
• CMV
• PVY
• 地高辛标记探针
• 斑点杂交 TMV
• CMV
• PVY
• digoxigenin-labelled cDNA probe
• dot-blot hybridization

根据已发表的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)的外壳蛋白基因序列,设计特异引物,分别以提取的TMV、CMV和PVY侵染的病叶总RNA为模板,反转录PCR进行体外扩增,分别得到长度为0.44、0.77、0.80 kb的目的片段,并克隆到pGEM-T easy质粒载体上,以构建的重组质粒为模板,用PCR方法合成了相应的地高辛标记的双链DNA探针。以合成的探针通过斑点杂交技术检测烟草病叶总RNA和烟草病叶汁液。TMV、CMV和PVY的3种地高辛探针检...

• 单位
  植物病虫害生物学国家重点实验室; 中国农业科学院植物保护研究所