人细胞角蛋白19片段单克隆抗体的制备和鉴定

作者：刘红; 刘宾; 李瑞娟; 杨萌萌; 李鹏聪; 张鑫; 孙旭东; 杨铁生

来源：中国医药生物技术, 2012, (06): 430-435.

• 角蛋白19
• 抗体
• 单克隆
• 肿瘤标记
• 生物学
• CYFRA21-1 Keratin-19
• Antibodies
• monoclonal
• Tumor markers
• biological
• CYFRA21-1

目的制备人细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的单克隆抗体(mAb),并对其免疫特性进行鉴定。方法用重组CYFRA21-1蛋白免疫BALB/c小鼠,取血清效价最高小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株,进行亚克隆,并鉴定分泌抗体亚型;制备小鼠腹水,用protein G从腹水中纯化出CYFRA21-1的mAb;用间接ELISA测定mAb的效价,Western blot和竞争ELISA对mAb的免疫特性进行检测,竞争ELISA对mAb的临床应用性进行评价。结果获得2G8和12G7两株能稳定分泌人CYFRA21-1mAb的杂交瘤细胞株,其分泌抗体都为轻链为κ的IgG...

• 单位
  北京源德生物医学工程有限公司; 北京大学; 北京大学人民医院