摘要
[目的]探讨冬凌草甲素(Ori)在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠免疫紊乱和组织损伤中的调节作用。[方法]将50只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组(SAP组)、SAP+Ori 5 mg/kg组、SAP+Ori 10 mg/kg组、SAP+Ori 20 mg/kg组,每组10只。采用化学诱导法建立SAP大鼠模型,皮下注射雨蛙素(25μg/kg)诱导SAP;计算胰腺质量指数,酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清脂肪酶、淀粉酶水平,苏木精-伊红(HE)染色观察胰腺组织病理形态学变化;免疫组化观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达;蛋白免疫印记(Western Blot)法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/Bcl-2蛋白表达;ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平;实时定量荧光聚合酶链反应(RT-PCR)法检测胰腺组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)mRNA表达水平。[结果]与对照组比较,SAP组大鼠胰腺组织功能明显下降(P<0.05),组织形态紊乱,Caspase-3蛋白高表达,凋亡指标(Bax/Bcl-2)显著增高(P<0.05),血清中TNF-α、iNOS、IL-10蛋白高表达(P<0.05),胰腺组织中IL-1β、IL-4 mRNA高表达(P<0.05)。与SAP组比较,5 mg/kg Ori给药治疗后,胰腺组织功能无明显差异;10、20 mg/kg Ori显著改善胰腺组织功能(P<0.05),降低细胞凋亡率,下调Caspase-3、Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达(P<0.05),抑制促炎因子TNF-α、iNOS蛋白表达和IL-1β m RNA表达(P<0.05),促进抗炎因子IL-10蛋白表达和IL-4 mRNA表达(P<0.05)。[结论] Ori抑制胰腺组织病理损伤、凋亡蛋白表达及促炎因子的分泌,缓解SAP大鼠免疫紊乱和组织损伤。
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