p53凋亡刺激蛋白2基因敲除小鼠的构建及其对二乙基亚硝胺诱导肝癌的影响

作者：刘晓霓; 寇卜心; 柴梦音; 陈德喜^*

来源：中华肝脏病杂志, 2020, 28(09).

• 肝细胞癌
• p53凋亡刺激蛋白2
• 基因敲除
• CRISPR/Cas9系统
• 二乙基亚硝胺

目的构建p53凋亡刺激蛋白2(ASPP2)基因敲除小鼠, 用该小鼠建立二乙基亚硝胺(DEN)诱导的肝癌模型以研究ASPP2的生物学功能。方法构建单链向导RNA寡聚核苷酸, 用CRISPR/Cas9系统制备ASPP2基因敲除小鼠。采用PCR法和测序方法鉴定F0、F1代及其子代的基因型。用DEN诱导ASPP2+/-小鼠建立肝癌模型。结果 PCR和测序结果表明F0代小鼠ASPP2基因敲除成功;F1代小鼠基因型符合ASPP2+/-, 获得稳定遗传性;F1代自杂交获得ASPP2+/-小鼠DEN诱导的肝癌模型成功率(7/8与3/8)明显高于野生型。结论基于CRISPR/Cas9系统成功构建ASPP2基因敲除小鼠, ASPP2基因敲除小鼠DEN诱导的肝癌模型成功率明显高于野生型。

• 单位
  北京市肝病研究所; 首都医科大学附属北京佑安医院