金银花提取物对哮喘模型小鼠气道平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

作者：宋远瑛^*; 阚竞; 彭坤; 李悦

来源：吉林大学学报(医学版), 2023, 49(04): 1001-1007.

DOI：10.13481/j.1671-587X.20230422

• 哮喘
• 金银花提取物
• 气道平滑肌细胞
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的：探讨金银花提取物对哮喘小鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖和凋亡的影响，阐明其相关的作用机制。方法：构建小鼠哮喘模型，分离原代ASMCs并进行鉴定。采用白细胞介素4(IL-4)诱导巨噬细胞RAW264.7 M2极化并进行鉴定。RAW264.7细胞分为对照组及低、中和高剂量金银花提取物组，对照组诱导RAW264.7细胞M2极化后与ASMCs共培养，低、中和高剂量金银花提取物组分别用不同浓度(50、100和200 mg·L-1)金银花提取物处理RAW264.7细胞1 h，再用60μg·L-1 IL-4处理6 h，随后将ASMCs与RAW264.7细胞共培养24 h。流式细胞术检测各组RAW264.7细胞中巨噬细胞表面标记蛋白CD86和CD206阳性细胞百分率，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组ASMCs培养上清液中白细胞介素10 (IL-10)水平，MTT法检测各组ASMCs增殖活性，流式细胞术检测各组ASMCs凋亡率。结果：细胞形态表现和免疫荧光染色结果证明所提取的细胞为ASMCs。RAW264.7细胞M2极化鉴定结果显示已诱导成为M2巨噬细胞。与对照组比较，低、中和高剂量金银花提取物组RAW264.7细胞中CD86阳性细胞百分率明显升高(P<0.05),CD206阳性细胞百分率明显降低(P<0.05),ASMCs培养上清液中IL-10水平和ASMCs增殖活性明显降低(P<0.05),ASMCs凋亡率明显升高(P<0.05)；与低剂量金银花提取物组比较，中和高剂量金银花提取物组RAW264.7细胞中CD86阳性细胞百分率明显升高(P<0.05),CD206阳性细胞百分率明显降低(P<0.05),ASMCs培养上清液中IL-10水平和AMSC增殖活性明显降低(P<0.05),ASMCs凋亡率明显升高(P<0.05)；与中剂量金银花提取物组比较，高剂量金银花提取物组RAW264.7细胞中CD86阳性细胞百分率明显升高(P<0.05),CD206阳性细胞百分率明显降低(P<0.05),ASMCs培养上清液中IL-10水平和ASMCs增殖活性明显降低(P<0.05),ASMCs凋亡率明显升高(P<0.05)。结论：金银花提取物可通过抑制巨噬细胞M2极化进而抑制哮喘小鼠ASMCs细胞增殖并促进其凋亡。

• 单位
  第一临床学院; 湖北中医药大学; 湖北省中医院