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摘要
目的 探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)通过刺激T细胞从而诱导破骨细胞分化增殖的作用机制。方法 取雌性C57bl/6小鼠10只,随机分为两组:LPS组(n=5)按2.5 mg/kg隔天腹腔注射LPS,对照组(Con组,n=5)注射等量生理盐水,共计28天。之后处死所有小鼠,收集股骨,应用micro-CT扫描分析小鼠股骨骨密度、骨体积分数、骨小梁数目、骨小梁厚度、骨小梁空隙,眼球取血测炎症因子白介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)的表达量,取两组小鼠的骨髓血进行流式细胞术,分析Th17细胞亚群比例。在体外将Th17肿瘤坏死因子α+(tumor necrosis factor α+,TNF-α+)细胞和CD4+IL-17-T细胞分别与成骨细胞、单核细胞体系以及RAW264.7细胞体系共混培养,观察破骨细胞的增殖分化情况。结果 LPS组小鼠外周血炎症因子IL-17A的表达量显著高于Con组[(1.460±0.395) pg/ml vs.(0.859±0.054) pg/ml],差异有统计学意义(P<0.01)。LPS组骨髓血中Th17 TNF-α+细胞比例显著高于Con组[(2.624±0.783)%vs.(0.35±0.026)%],差异有统计学意义(P<0.01)。在成骨细胞、单核细胞体系中Th17 TNF-α+组的破骨细胞分化的数量显著高于CD4+IL-17-T细胞组(483.97±60.92 vs.158.21±32.56),差异有统计学意义(P<0.05),Th17TNF-α+组破骨细胞F-actin环荧光强度显著强于CD4+IL-17-T细胞组(5.28±0.64 vs.1.79±0.23),差异均有统计学意义(P<0.05)。在RAW264.7细胞体系中Th17 TNF-α+组的破骨细胞分化的数量显著高于CD4+IL-17-T细胞组(322.33±43.35 vs.90.72±15.05),差异有统计学意义(P<0.05),Th17 TNF-α+组破骨细胞F-actin环荧光强度显著强于CD4+IL-17-T细胞组(4.07±0.32 vs.1.00±0.17),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 LPS能刺激骨髓中Th17TNF-α+细胞亚群的比例增高,进而促进破骨细胞的增殖分化。
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