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摘要
长期超风险限值蓝光照射可能导致视网膜变性疾病，而视网膜色素上皮损伤是视网膜光损伤的关键来源。本研究探讨了448 nm蓝光对人视网膜色素上皮细胞的损伤作用及凋亡方式。25 mW/cm2蓝光照射ARPE-19细胞3、6、9、12 h，照后即刻采用钙黄绿素乙酰甲酯染色检测细胞活性，并在照后24 h采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测坏死性凋亡相关基因表达，同时采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测坏死性凋亡和DNA损伤标志蛋白表达。9 h和12 h照射组细胞形态发生显著变化，表现为细胞肿胀、间隙增大、漂浮细胞增多、细胞碎片增加；蓝光照射3～9 h后RIPK1、RIPK3 mRNA表达量较正常组出现明显升高，且在照射9 h时达到最大值；蓝光照射6～12 h后RIPK1、RIPK3、P-MLKL坏死性凋亡蛋白标志物的表达量随蓝光照射时间增加而明显升高，并在照射12 h时达到最高值；蓝光照射3～12 h后DNA损伤标志物γ-H2AX蛋白表达量明显升高，并在照射12 h时达到最高值。蓝光照射9 h坏死性凋亡相关基因表达量达到最大，照射12 h基因表达明显下降但坏死性凋亡相关蛋白表达量累积到最大，这提示25 mW/cm2蓝光照射9～12 h可诱导ARPE-19细胞发生坏死性凋亡，并表明DNA损伤程度与细胞坏死性凋亡发生可能存在关联。
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单位河北大学; 中国人民解放军军事科学院; 生命科学学院
