S100A9真核表达载体pEGFP-N3-S100A9的构建及其对U251细胞生长的影响

作者：陈松; 程远; 廖鹏; 邓金木

来源：第三军医大学学报, 2012, (16): 1596-1599.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2012.16.027

• pEGFP-N3
• S100A9
• 胶质瘤
• 基因转染 pEGFP-N3
• S100A9
• glioma
• gene transfection

目的构建S100A9真核表达载体pEGFP-N3-S100A9,观察其对胶质瘤细胞系U251内S100A9基因表达及细胞生长的影响。方法应用RT-PCR和DNA重组技术构建pEGFP-N3-S100A9融合蛋白表达载体,并用双酶切、测序进行鉴定,用脂质体转染胶质瘤细胞系U251细胞。荧光显微镜下动态观察U251细胞绿色荧光的变化;培养24 h后提取转染细胞的总RNA及总蛋白。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)观察其mRNA表达情况,Western blot检测其蛋白表达情况,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果酶切鉴定与S100A9全长基因长度一致(345 bp);测序证实...

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院