摘要
目的:明确肺炎链球菌MarR家族蛋白SPD0379对细菌磷壁酸(teichoic acids,TA)的调控作用。方法:通过凝胶阻滞实验验证SPD0379蛋白与rafX基因启动子序列的结合,通过Lac Z报告基因观察细菌在spd0379基因缺陷后的rafX基因表达变化,通过斑点杂交、ELISA和流式细胞术检测细菌磷壁酸的含量变化,通过生长曲线分析揭示SPD0379蛋白在细菌生长中的作用。结果:SPD0379蛋白与rafX基因启动子序列发生特异性结合,spd0379基因缺陷后,细菌的rafX基因表达上调(t=10.010,P=0.001),免疫斑点与ELISA均显示磷壁酸含量明显升高(t=5.848,P=0.004;t=4.653,P=0.001),且缺陷菌的自溶较野生菌明显提前。结论:SPD0379蛋白负调控rafX基因的表达,抑制细菌磷壁酸的合成,参与细菌自溶的调控。
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单位重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院