摘要
数字聚合酶链反应(PCR)是在实时荧光定量PCR的基础上发展起来的第3代核酸定量分析技术。其不依赖标准曲线、耐受性强、灵敏度高等特性使单分子层面的精准定量得以实现。随着商业平台的开发,数字PCR的可操作性提升,近年来逐渐在临床微生物领域展现出了良好的应用前景,具体包括定量检测结核分枝杆菌及2019新型冠状病毒等病原微生物;直接检测无菌体液(如房水中的人巨细胞病毒);定量检测HIVDNA以评估疗效及病程发展;检测甲型流感病毒对奥司他韦的耐药性突变;标定实时荧光定量PCR的参考标准品等。该文将对数字PCR的技术原理、技术优势、局限性,以及在临床病原菌检测领域的前沿应用展开论述。
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单位复旦大学附属妇产科医院; 上海健康医学院