摘要
目的利用大肠杆菌表达登革病毒2型外膜蛋白,获得重组抗原应用于血清学检测。方法用RT-PCR法扩增登革2型病毒去除C端100个氨基酸的外膜蛋白基因片段,与表达载体pET-30a连接,构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,重组蛋白用电洗脱法进行纯化。纯化的重组蛋白用间接ELISA法检测登革2型感染者血清,检测结果与间接免疫荧光法、澳大利亚Panbio试剂进行比较。结果重组质粒构建成功,经IPTG诱导后在大肠杆菌中表达重组蛋白。纯化的重组蛋白用于检测登革2型感染者血清,以IFTA作为参照标准,其敏感性为95.6%,特异性为96.8%。与澳大利亚Pan-bio IgG捕获法ELISA试...
-
单位福建医科大学附属泉州第一医院; 福建省疾病预防控制中心