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摘要
为了筛选基因VII型新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）W蛋白与鸡胚成纤维细胞（DF-1）的互作蛋白，本研究构建了基因VII型毒株W基因的重组真核表达质粒，将重组质粒转染DF-1细胞48 h后收集样品，经免疫沉淀法、SDS-PAGE电泳胶条回收、蛋白酶解、串联质谱测序技术等步骤，剔除空白对照组的非特异性蛋白后，共鉴定到227条肽段和77个宿主蛋白与W蛋白互作。GO分析显示，这些与W蛋白互作的宿主蛋白主要富集在细胞加工（41个）、蛋白/DNA结合（46个）、细胞定位（22个）、转录调控（1个）等；KEGG分析显示，这些宿主蛋白主要与核糖体（8个）、代谢途径（6个）、RNA运输（5个）等信号通路有关；PPI网络显示，有40个宿主蛋白形成了以核糖体相关蛋白、核输入相关蛋白、肌动蛋白为中心的互作网络，其中宿主蛋白YWHAZ、KPNB1、KPNA5、RPS8、RPS25、NACA、DDX3X等均涉及上述功能注释，推测W蛋白可能参与转录翻译、转录调控、核转运活动相关。进一步通过免疫共沉淀试验验证了W蛋白与YWHAZ蛋白存在互作关系，这一发现将为NDV W蛋白的作用机制提供基础数据。
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