RNA干扰CYP1B1基因沉默抑制多不饱和脂肪酸诱导的人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖

作者：刘蕾; 王斌; 糜漫天

来源：肿瘤, 2012, 32(06): 429-434.

• 乳腺肿瘤
• RNA,小分子干扰
• 类固醇11-β-羟化酶
• 儿茶酚-O-甲基转移酶
• 脂肪酸类,不饱和

目的:探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)介导的细胞色素P4501B1(cytochrome P-4501B1,CYP1B1)基因沉默对二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)和花生四烯酸(arachidonic acid,AA)作用下乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响。方法:应用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测经EPA和AA处理后MDA-MB-231细胞的增殖情况。采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术干扰CYP1B1的表达,随后应用荧光实时定量PCR(real-time-uorescence quantitative PCR,RFQ-PCR)和蛋白免疫印迹法检测转染效率,以及siRNA干扰后EPA和AA作用下MDA-MB-231细胞中CYP1B1和儿茶酚氧位甲基转移酶(catechol-O-methyltransferase,COMT)mRNA和蛋白的表达情况。采用CCK-8法检测siRNA干扰后EPA和AA作用下MDA-MB-231细胞的增殖情况。结果:EPA处理组的MDA-MB-231细胞数明显少于对照组,而AA处理组的MDA-MB-231细胞则明显多于对照组(P<0.05)。转染CYP1B1siRNA的MDA-MB-231细胞中,CYP1B1mRNA和蛋白的表达均有所下降,而COMT mRNA和蛋白的表达水平则有所上升。CYP1B1siRNA转染的MDA-MB-231细胞的增殖能力下降,且EPA处理组的MDA-MB-231细胞数明显多于阴性对照组(P<0.05)。结论:CYP1B1基因沉默能够抑制MDA-MB-231细胞的增殖,逆转EPA对细胞增殖的抑制作用。EPA可能通过调节CYP1B1的表达来抑制乳腺癌细胞的增殖。

• 单位
  第三军医大学