实时荧光PCR方法检测多种食源性致病菌的研究

作者：姬莉莉

来源：医学食疗与健康, 2022, 20(15): 178-181.

• 实时荧光PCR
• 食源性致病菌
• 核酸检测

目的：应用实时荧光PCR技术（real time PCR）联合检测小肠结肠炎耶尔森菌、霍乱弧菌、肠出血性大肠杆菌O157、副溶血弧菌、沙门氏菌、志贺氏菌、空肠弯曲菌和结肠弯曲菌。方法：针对小肠结肠炎耶尔森菌foxA基因、霍乱弧菌ompW基因、肠出血性大肠杆菌O157 rfbE基因、副溶血弧菌TLH基因、沙门氏菌ssaR基因、志贺氏菌ipaH基因、空肠弯曲菌hipo基因和结肠弯曲菌glyA基因，在其保守区域设计特异性引物和探针，检测多种病原菌的特异性和灵敏度，并对临床样本和模拟样本进行检测，联合鉴别多种食源性致病菌。结果：该方法特异性强，与单核细胞增生李斯特菌、普通变形杆菌、绿脓杆菌、嗜水气单胞菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、轮状病毒A组、轮状病毒B组、轮状病毒C组、诺如病毒GⅡ、札如病毒、星状病毒、肠道腺病毒核酸无交叉反应；灵敏度高，检测阳性样品均可达102 copies/mL；检测30份临床样本和50份模拟样本，准确性100%。结论：多种食源性致病菌实时荧光PCR检测方法准确、可靠、操作简单，今后可以大规模加速多种食源性致病菌的检测。