RECQ1沉默对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭及上皮间质转化的影响

作者：何晓南^*; 刘记伟

来源：口腔生物医学, 2020, 11(02): 102-112.

• 口腔鳞癌
• RECQ1
• 细胞增殖
• 细胞侵袭
• 上皮间质转化

目的:探讨沉默DNA解螺旋酶RECQ1基因对口腔鳞癌细胞增殖、迁移及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养人正常口腔角质上皮HOK细胞、口腔鳞癌Cal27细胞,采用实时定量RT-PCR与Western Blot检测RECQ1 mRNA及蛋白表达水平。采用RNA干扰法靶向沉默Cal27细胞RECQ1基因,实验分为5组:si-RECQ1组(si-RECQ1转染至Cal27细胞)、si-RECQ1+转化生长因子β1(TGF-β1)组(RECQ1沉默后加入TGF-β1)、si-NC组、TGF-β1组及空白对照组。采用CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率,Transwell法检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用实时定量RT-PCR与Western Blot检测RECQ1及上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、N钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)等EMT相关蛋白表达。结果:与HOK细胞相比,Cal27细胞RECQ1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与空白对照组、si-NC组相比,si-RECQ1组Cal27细胞中RECQ1 m RNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与空白对照组、si-NC组、si-RECQ1+TGF-β1组相比,si-RECQ1组Cal27细胞增殖抑制率、E-cadherin mRNA及蛋白表达水平均显著升高,而TGF-β1组显著降低(P<0.05),且si-RECQ1组Cal27细胞侵袭数量、迁移距离、Vimentin、N-cadherin mRNA及蛋白表达水平均显著降低,而TGF-β1组显著升高(P<0.05)。结论:RECQ1沉默后明显抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭,其机制可能是通过抑制EMT过程而实现。

• 单位
  重庆市第九人民医院