摘要
目的探讨以猪角膜脱细胞基质(cornea acellular matrix,CACM)为载体培养猫骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)体外构建角膜后板层的可行性。方法分离培养猫骨髓EPC,并用PKH26标记,观察标记效率。用10g.L-1Triton X-100脱细胞,联合逐步切薄角膜、超净台中自然晾干法制备角膜脱细胞基质,行HE染色,Hoechst染核,电镜观察猪CACM的胶原排列和细胞脱除情况。将标记的EPC接种到猪CACM上,观察细胞的生长情况。结果培养的猫骨髓EPC形态上呈多边形,几乎全部EPC可以标记上PKH26,细胞膜呈现红色荧光,至少可维持1个月。制备的猪CACM可保持整齐的胶原排列,细胞完全脱除。EPC在CACM上呈单层生长,贴附较好。构建的组织工程角膜后板层与正常角膜相似。结论以猪CACM为载体培养猫骨髓EPC可体外构建组织工程角膜后板层,为进一步体内移植打下基础。
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