DNA甲基化参与LPS对奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能的影响

作者：张莉; 魏祥飞; 冉耀祥; 姜毓君; 曲波; 王春梅^*

来源：东北农业大学学报, 2023, 54(05): 38-46.

DOI：10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2023.05.005

• LPS
• 奶牛乳腺上皮细胞
• DNA甲基化
• 泌乳功能
• AKT1

利用脂多糖（LPS）诱导奶牛乳腺上皮细胞（Bovine mammary epithelial cells,BMECs）建立炎症细胞模型，采用RT-qPCR检测BMECs中炎症因子及AKT1 mRNA表达变化；采用BSP(Bisulfite sequencing PCR)检测AKT1基因启动子区域甲基化水平；采用组织细胞甘油三酯（Triglyceride,TG）含量酶法测定试剂盒检测细胞中甘油三酯含量；采用Bovine lactose ELISA KIT检测细胞中乳糖含量；采用Western blot技术检测β-casein、AKT1、PAKT1、DNA甲基转移酶DNMT1和DNMT3A蛋白表达情况。试验结果表明，LPS诱导后奶牛乳腺上皮细胞中甘油三酯、乳糖和β-酪蛋白合成减少，AKT1表达量减少，P-AKT1蛋白表达量也减少，同时DNMT1和DNMT3A蛋白表达量增加，AKT1基因启动子甲基化水平升高，表明DNA甲基化参与乳腺炎条件下奶牛泌乳调控，LPS也通过促进DNA甲基转移酶表达提高AKT1基因甲基化水平而抑制AKT1表达，抑制乳脂、乳糖和乳蛋白合成。

• 单位
  生命科学学院; 东北农业大学