环状RNA0001495/微小RNA-527/Robo1轴对膀胱癌细胞增殖和转移的影响

作者：程鹤鹏; 冯留伟; 高磊; 侯淑超; 李扬

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(07).

• 环状RNA
• 微小RNA
• Robo1
• 膀胱癌
• 增殖
• 转移

目的探讨环状RNA(circRNA)0001495/微小RNA(miR)-527/Robo1轴对膀胱癌细胞增殖和转移的影响。方法人膀胱癌细胞系T24培养至对数生长期, 分为circRNA对照组和circRNA0001495 KD组, 采用对照circRNA短发卡RNA(shRNA)和circRNA0001495 shRNA慢病毒感染T24细胞, 建立稳转细胞系。分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色分析两组细胞增殖能力;采用划痕实验和Transwell实验分析两组细胞迁移和侵袭能力。生物信息学和双荧光素酶报告基因分析circRNA0001495的靶基因;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析circRNA0001495靶基因miR-527表达水平;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-527的靶蛋白。组间计量数据比较采用t检验。结果对照组细胞circRNA0001495表达水平(1.02±0.06)明显高于circRNA0001495 KD组细胞(0.67±0.05), 差异有统计学意义(t=10.750, P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值水平(1.97±0.06)明显高于circRNA0001495 KD组细胞(1.67±0.09), 差异有统计学意义(t=6.262, P<0.05)。对照组细胞EdU阳性率水平(1.97±0.06)明显高于circRNA0001495 KD组细胞(1.67±0.09), 差异有统计学意义(t=6.262, P<0.05)。对照组细胞划痕愈合率[(79.65±4.05)%]明显高于circRNA0001495 KD组细胞[(55.13±5.41)%], 差异有统计学意义(t=8.880, P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(114.50±12.37)个]明显高于circRNA0001495 KD组细胞[(84.50±12.90)个], 差异有统计学意义(t=4.112, P<0.05)。miR-527是circRNA0001495的靶基因。对照组细胞miR-527表达水平(0.88±0.05)明显低于circRNA0001495 KD组细胞(1.38±0.10), 差异有统计学意义(t=10.690, P<0.05)。Western blot结果显示, 对照组细胞Robo1蛋白表达水平(1.25±0.14)明显高于circRNA0001495 KD组细胞(0.79±0.08), 差异有统计学意义(t=7.196, P<0.05)。结论 circRNA0001495敲降可显著抑制膀胱癌细胞的增殖和转移, 可能通过靶向调节miR-527/Robo1轴实现的。

• 单位
  河南大学淮河医院