油果实中查尔酮合成酶基因PsCHS的克隆表达分析及其启动子的分离

作者：姜翠翠; 王玉珍; 叶新福

来源：福建农业学报, 2016, 31(01): 16-21.

DOI：10.19303/j.issn.1008-0384.2016.01.004

• 
• 查尔酮合成酶
• 全长cDNA
• 序列分析
• 调控元件
• 表达分析

从成熟果实均一化全长cDNA文库中分离了编码CHS基因的全长cDNA序列,命名为PsCHS,根据其序列设计引物,采用Genome Walking方法从基因组DNA中分离获得PsCHS基因上游的调控序列,命名为PsCHSp,PsCHS基因全长1 442bp,其中ORF 1 176bp,编码392个氨基酸;采用APA-Walking技术,获得该基因的5ˊ端调控区,经在线软件预测,启动子序列含有典型的结构特征元件TATA-box和CAAT-box,还包含光响应元件、厌氧诱导元件、胚乳表达相关元件、MYB结合位点以及激素响应元件;RT-PCR结果显示,PsCHS基因在果实发育的前期表达量较高,花后40d表达量最高,随后开始下降,果实成熟期表达量较低。分离获得的PsCHS基因属于查尔酮合成酶基因家族成员之一,查尔酮合成酶(Chalcone synthase,CHS,EC 2.3.1.74)是类黄酮合成途径中的一个重要酶,该基因可能对类黄酮的合成起到调控作用。

• 单位
  福建省农业科学院果树研究所; 福建农林大学