组织因子/活化凝血Ⅶ因子复合物对大肠癌LoVo细胞系表达基质金属蛋白酶-7的调控作用

作者：汤坚强; 万远廉; 刘玉村; 戎龙; 汪欣; 吴涛; 潘义生; 朱静

来源：北京大学学报(医学版), 2007, (05): 453-457.

DOI：10.19723/j.issn.1671-167x.2007.05.029

• 因子Ⅶa
• 结直肠肿瘤
• 基质金属蛋白酶类
• 丝裂原激活蛋白激酶类

目的:观察活化凝血Ⅶ因子(actived factorⅦ,FⅦa)对大肠癌LoVo细胞系表达基质金属蛋白酶-7(ProMMP-7)的影响,探讨其可能的组织因子信号转导通路。方法:(1)用Western blot检测100nmol/L FⅦa刺激LoVo细胞系不同时间点及不同浓度FⅦa刺激LoVo细胞系12h后细胞ProMMP-7蛋白水平;用Western blot检测5mg/L组织因子(tissue factor,TF)抗体预孵育LoVo细胞系0.5h后再给予100nmol/L FⅦa刺激12h后细胞ProM-MP-7蛋白水平。(2)观察用100nmol/L FⅦa刺激时丝裂原激活蛋白激酶(MAPKs)各亚通路信号蛋白(包括细胞外信号调节激酶ERK1/2,丝裂原激活蛋白激酶P38及c-Jun-N末端蛋白激酶JNK)磷酸化水平变化。(3)在FⅦa刺激前0.5h分别加入ERK1/2,P38和JNK信号通路特异阻断剂PD98059,SB203580和SP600125,培养12h后检测细胞ProMMP-7蛋白的变化。结果:(1)FⅦa可刺激LoVo系细胞表达ProMMP-7并呈时间依赖性和剂量依赖性,在刺激的12h左右ProMMP-7达峰值,是正常对照组的5.5±0.6倍(P=0.006);用TF抗体预处理的LoVo细胞系,其FⅦa上调ProMMP-7表达的作用被完全阻断。(2)用100nmol/L FⅦa刺激LoVo细胞5min时,MAPKs磷酸化活性蛋白p-ERK1/2和p-P38表达水平开始增加,至10min时达峰值(分别为对照组的2.2±0.3倍和3.9±0.5倍,P值分别为0.02和0.01),存在时间效应关系,而p-JNK活性无改变(为对照组的1.1±0.1倍)。(3)ERK1/2通路阻断剂PD98059及P38通路阻断剂SB203580可部分减少FⅦa上调LoVo细胞系表达ProMMP-7的效应,分别降低了32%±5%(P=0.01)和61%±10%(P=0.009),JNK通路特异性阻断剂SP600125对ProMMP-7的表达无明显影响。结论:FⅦa通过与LoVo细胞表面的TF结合诱导ProMMP-7的表达,并呈时间依赖性和剂量依赖性;ERK1/2和P38MAPKs亚通路参与LoVo细胞TF信号转导通路并与TF/FⅦa调控ProMMP-7表达有关。

• 单位
  北京大学第一医院