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摘要
目的探索由外泌体介导的多发性骨髓瘤细胞对硼替佐米(Btz)耐药的作用机制。方法在首次确诊骨髓瘤的患者中,针对Btz耐受的类型采集外周血,行超速离心法分离血清中的外泌体,并用电镜技术、NTA法以及WB技术鉴定。用不同浓度的Btz预处理骨髓瘤细胞,选择合适的药物浓度,再用不同浓度外泌体处理骨髓瘤细胞,通过MTS法检测经外泌体处理的瘤细胞对Btz的敏感程度。搜索外泌体数据库exocarta,运用STRING绘制网络图和蛋白互作表格。结果外周血中分离出的囊泡主要分布在200 nm以下,颗粒均值153 nm,众数140.1 nm。WB检测外泌体标志蛋白CD63、Tsg101和Alix表达,外泌体表达呈阳性。经外泌体预处理的骨髓瘤细胞对Btz的敏感度下降。在相同浓度Btz预处理条件下,随着外泌体处理时间、浓度的增加,骨髓瘤细胞耐药能力愈强。数据库搜索到人血清外泌体蛋白ABCB1、ABCB4、PDCD6IP、EGFR等,其中EGFR为网络节点。结论一定浓度的外泌体可作为信号载体介导多发性骨髓瘤细胞对Btz的耐药。EGFR可能是引起外泌体促进骨髓瘤细胞Btz耐药的关键蛋白。
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