高强度聚焦超声治疗对裸鼠皮下胶质瘤VEGF、PCNA表达以及细胞凋亡的影响

作者：肖文峰; 李俊; 霍钢; 翟安林; 郑履平

来源：中国神经精神疾病杂志, 2015, 41(07): 416-421.

• 高强度聚焦超声
• 胶质瘤
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的通过观察高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)对裸鼠皮下人胶质瘤模型作用后血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白的表达和细胞的凋亡,探讨HIFU治疗后对交界区及照射区细胞增殖和细胞凋亡的影响。方法建立18只裸鼠左右背部皮下胶质瘤模型,用频率9.7MHz,焦距4.5mm,声强2500W/cm2的HIFU连续照射20s。按照射后动物处死时间随机分为7d组,14d组,30d组,每组各6只裸鼠即12个皮下胶质瘤组织;应用免疫组化法检测HIFU作用后第7d、14d、30d照射区、交界区、正常区VEGF、PCNA蛋白的表达;应用原位末端标记法(Td T-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL)检测照射区、交界区、正常区的凋亡细胞。结果免疫组化观察到,各时刻点交界区及正常区均有VEGF及PCNA表达并检测到凋亡染色阳性的细胞,照射区均无PCNA蛋白的表达及未检测到凋亡细胞。第7d时交界区VEGF阳性细胞百分数(23.79%±3.11%)低于正常区(46.16%±2.43%)(F=110.03,P<0.05);照射区VEGF阳性细胞百分数(10.94%±3.95%)低于正常区(46.16%±2.43%)(F=272.80,P<0.05)。第14d时交界区VEGF阳性细胞百分数(17.17%±2.89%)低于正常区(43.47%±3.77%)(F=152.05,P<0.05);第30d时交界区VEGF阳性细胞百分数(9.27%±2.08%)低于正常区(44.58%±3.34%)(F=274.1,P<0.05 2)。交界区的PCNA标记指数(PCNA labeling index,PCNA LI)(33.04%±4.31%)在第7d时低于正常区(65.15%±3.85%),(F=242.46,P<0.05);在14d时为(21.05%±1.96%)低于正常区(62.99%±3.34%)(F=413.52,P<0.05);在30d时为(6.36%±0.51%)低于正常区(62.07%±18.07%)(F=729.59,P<0.05)。第7d时交界区的凋亡指数(apoptotic index,AI)(26.10%±4.54%)高于正常区(1.43%±0.35%)(F=216.22,P<0.05)。14d时交界区的凋亡指数AI(65.70%±1.14%)高于正常区(1.82%±0.31%)(F=1448.64,P<0.05);30d时交界区的凋亡指数AI(82.02%±3.98%)高于正常区(2.52%±0.29%)(F=2244.33,P<0.05)。结论在本实验设定参数及声学剂量情况下,HIFU除了对照射区组织产生直接的杀灭作用外,还能抑制交界区的细胞增殖以及诱发细胞凋亡的发生。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院; 川北医学院附属第二医院