MALDI-TOF MS技术快速区分携带2毒力基因的高毒力肺炎克雷伯菌

作者：孙巧玲; 舒玲斌; 胡洁; 胡燕燕; 张嵘

来源：中华检验医学杂志, 2018, 41(08): 571-576.

• 肺炎克雷伯菌
• 细菌蛋白质类
• 转录因子
• 光谱法,质量,基质辅助激光解吸电离

目的评价基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）技术快速区分携带rmpA2毒力基因的高毒力肺炎克雷伯菌的能力。方法对浙江大学医学院附属第二医院和河南省人民医院的57株肺炎克雷伯菌,PCR扩增rmpA2毒力基因和荚膜血清型基因,多位点序列分型方法（MLST）进行分型,拉丝试验进行高黏液表型测定。MALDI-TOF MS对肺炎克雷伯菌进行鉴定并对峰图进行二维分析和算法统计,包括采用支持向量机算法（SVM）,遗传算法（GA）,监督使神经网络算法（SNN）和快速分类算法（QC）进行数据分析并建立相应模型,得到分型区分的特征峰。结果 57株肺炎克雷伯菌中有28株携带rmpA2毒力基因,MLST均为ST11型,其中拉丝试验阳性有5株;29株不携带rmpA2毒力基因,主要ST型为ST11（n=23）,还包括ST15 （n=3）,ST1、ST76和ST473各一株。质谱将肺炎克雷伯菌较清晰地划分成两个区域,ClinProTools软件可准确区分84.2%（48/57）的菌株。ClinProTools软件四种算法结果基本相似,SVM特异性和灵敏度最高,分别为93.23%和100%。采用ClinProTools对质谱峰进行统计显示,得到区分rmpA2基因阳性组和阴性组的2个特征峰分别为7 168.9和7 280.76,在峰强度上存在一定的差异。结论 MALDI-TOF MS快速区分携带rmpA2毒力基因的高毒力肺炎克雷伯菌方法灵敏度和特异性都在90%以上,得到两个特征峰在峰强度上存在一定差异,需进一步验证。（中华检验医学杂志,2018, 41:571-576）

• 单位
  浙江大学医学院附属第二医院