SiRNA干扰BTN3A3对脑胶质瘤细胞凋亡作用的研究

作者：张梦梦; 张俊文; 米蕊芳; 金贵善; 刘福生^*

来源：中华神经外科杂志, 2020, 36(09): 951-956.

• 神经胶质瘤
• 细胞凋亡
• 嗜乳脂蛋白
• 嗜乳脂蛋白亚家族成员A3

目的探讨采用siRNA干扰嗜乳脂蛋白亚家族成员A3(BTN3A3)对脑胶质瘤细胞凋亡的影响。方法实验采用胶质瘤细胞株(HS683、U251)以及原代胶质瘤细胞, 均设立阴性对照组(NC组)以及转染不同序列siRNA的Si-1组(转染1序列)和Si-2组(转染2序列)。应用蛋白质免疫印迹方法分析不同胶质瘤细胞株、小胶质细胞株(HMC3)中BTN3A3的表达情况。通过转染siRNA敲减BTN3A3后, 采用流术细胞术分析各细胞株中细胞凋亡的变化情况。分离培养手术切除的脑胶质瘤组织, 获得原代胶质瘤细胞后, 采用蛋白质免疫印迹方法分析原代细胞中BTN3A3的表达水平;通过转染siRNA敲减BTN3A3后, 采用流式细胞术分析原代细胞的细胞凋亡变化情况。结果 BTN3A3在HS683(1.12±0.03)和U87-MG细胞(1.08±0.05)中的表达水平显著高于HMC3细胞(0.66±0.02)(均P<0.01)。U251细胞Si-1组、Si-2组BTN3A3的表达水平分别为0.11±0.01、0.12±0.01, 均低于NC组(0.21±0.01)(均P<0.01);HS683细胞Si-1组、Si-2组BTN3A3的表达水平分别为0.77±0.03、0.78±0.04, 均低于NC组(1.01±0.03)(均P<0.01)。敲减BTN3A3后, 与NC组相比, HS683细胞的早期凋亡比率(NC组:31.6%, Si-1组:53.7%, Si-2组:63.3%)、U251细胞的晚期凋亡比率(NC组:10.4%, Si-1组:18.9%, Si-2组:26.5%)升高。BTN3A3在原代胶质瘤细胞中的表达水平高于HMC3细胞(分别为0.75±0.07和0.55±0.06, P<0.05)。采用siRNA敲减后, 原代胶质瘤细胞中BTN3A3的表达水平降低(NC组:0.90±0.01, Si-1组:0.44±0.01, Si-2组:0.49±0.02, Si-1组和Si-2组与NC组相比, 均P<0.01), 晚期细胞凋亡比率升高(NC组:12.3%, Si-1组:22.6%, Si-2组:18.2%)。结论采用siRNA干扰BTN3A3可促进胶质瘤细胞株、原代胶质瘤细胞的凋亡。

• 单位
  首都医科大学附属北京天坛医院; 首都医科大学