分子信标荧光定量PCR检测H3N2亚型猪流感病毒方法的建立

作者：禹思宇; 周宇; 唐连飞; 孟芳; 袁晓芬; 梁斌

来源：中国动物检疫, 2015, 32(07): 67-76.

• 猪流感病毒
• H3N2亚型
• 分子信标探针
• 实时荧光定量PCR

利用新型荧光探针—分子信标,建立一种检测猪流感病毒的新方法。根据H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的HA和NA基因的保守基因序列,分别设计并合成了特异性引物和分子信标探针,利用实时荧光定量PCR技术检测H3N2亚型SIV。构建重组质粒p SK-H3和p SK-N2并绘制标准曲线。结果显示,该检测方法的敏感性达到102拷贝/μL;与其它主要相关病毒均不发生交叉反应,批内和批间试验的重复性变异系数(CV)均小于3%,表明该方法灵敏度强、特异性好。此方法的建立将为流感病毒H3N2亚型定型检测提供一种快速有效的方法。

• 单位
  湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心; 惠州出入境检验检疫局