微小RNA-96靶向叉头框转录因子O1促进肺癌细胞增殖和迁移

作者：何剑营; 黄燕燕; 陈志军; 方可欣; 竺王玉^*

来源：中华实验外科杂志, 2020, 37(12).

• 肺癌
• 微小RNA-96
• 叉头框转录因子O1
• 增殖
• 迁移

目的探讨微小RNA(miRNA, miR)-96通过靶向叉头框转录因子O1(FOXO1)促进肺癌细胞增殖和迁移的作用。方法应用茎环反转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-96在肺癌细胞株中的表达;干扰慢病毒感染抑制miR-96表达后, 分别利用细胞增殖试验(CCK-8)和划痕试验检测其对肺癌细胞增殖和迁移的影响;蛋白质印迹法(Western blot)和双荧光素酶活性试验验证miR-96靶基因FOXO1。应用GraphPad Prism 5统计学软件进行分析, 计量资料比较采用t检验。结果 CCK-8实验显示抑制H1299细胞miR-96表达后, 实验组24、48、72 h吸光度值分别为1.293±0.019、1.684±0.038、2.180±0.034, 明显低于对照组的1.655±0.056、1.880±0.020、2.493±0.060, 差异有统计学意义(t=5.646、4.426、14.670, P<0.01);划痕试验显示对照组4 h和10 h细胞迁移率为(29.21±3.96)%、(47.49±3.33)%, 明显高于实验组[(5.80±2.94)%、(13.63±3.18)%], 差异有统计学意义(t=4.748、7.352, P<0.01);筛选miR-96靶基因FOXO1, 将miR-96过表达后, 肺癌细胞FOXO1表达明显降低;反之, 抑制miR-96表达后, FOXO1表达明显增高。荧光素酶活性试验显示miR-96和FOXO1 3’非翻译区(3’UTR)野生型质粒共转染后, 野生型为(22.5±7.6)%, 与对照组的(97.2±13.2)%及突变型的(115.6±13.5)%比较, 荧火虫/海肾荧光素酶比值明显降低(t=14.750、12.040, P值均<0.01)。结论 miR-96通过靶向调控FOXO1促进肺癌细胞增殖和迁移。

• 单位
  舟山医院