摘要
目的目前关于tRF-31对乳腺癌的影响研究报道较少。文中旨在检测和分析乳腺癌组织中tRF-31的表达水平,探讨其对乳腺癌细胞增殖的影响。方法收集2017年11月至2019年2月南京医科大学附属肿瘤医院乳腺外科乳腺癌患者的32份肿瘤组织标本及对应的癌旁组织。从中选取6份癌组织以及对应的癌旁组织进行高通量测序,通过高通量测序,选择tRF-31(FC=6.5781,P=0.023)作为研究对象。采用RT-PCR法测定癌组织及癌旁组织的tRF-31表达量,运用ROC曲线分析tRF-31的表达对乳腺癌诊断的灵敏度和特异性。将2种人乳腺癌细胞株(MDA-MB-231和MCF-7)分别分为:对照组(转染negative control)和tRF-31组(转染tRF-31抑制试剂tRF-31 inhibitor)。采用CCK-8和克隆形成实验检测转染后乳腺癌细胞增殖的情况。并测定转染后乳腺癌细胞苏氨酸激酶(AKT)和雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达的变化,探索tRF-31与AKT/mTOR信号通路的关系。结果 tRF-31在癌组织(0.103±0.207)的表达显著高于癌旁组织(0.028±0.039),差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,tRF-31检测乳腺癌的灵敏性为90.63%,特异性为53.13%。MDA-MB-231细胞中,tRF-31组tRF-31的表达量较对照组明显降低[(0.267±0.012)vs(1±0.040),P<0.01];MCF-7细胞中,tRF-31组tRF-31的表达量较对照组亦明显降低(P<0.01)。MDA-MB-231和MCF-7细胞中,tRF-31组细胞0、 24、 48、 72 h增殖能力较对照组均降低(P<0.05)。MDA-MB-231细胞中, tRF-31组细胞克隆形成率[(43.67±3.29)%]较对照组[(100±3.74)%]明显降低(P<0.01);MCF-7细胞中, tRF-31组细胞克隆形成率[(49±2.94)%]较对照组[(100±4.89)%]明显降低(P<0.01)。MDA-MB-231和MCF-7细胞中,tRF-31组AKT和mTOR的蛋白水平较对照组明显下降。结论 tRF-31在乳腺癌组织中显著高表达,并可促进乳腺癌细胞的增殖。这一结果有望为乳腺癌治疗提供新靶点。
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单位南京医科大学; 江苏省肿瘤防治研究所; 江苏省肿瘤医院