Centrobin与BRCA2蛋白间相互作用及其细胞定位

作者：薛丽; 杨芳; 张贺龙; 赵锦荣; 张文红; 白玉杰

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2009, 25(11): 1017-1023.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2009.11.008

• 中心体
• 乳腺癌易感基因2
• 中心体的BRCA2相互作用蛋白
• 有丝分裂

为分析乳腺癌易感基因2(breast cancer susceptibility gene2,BRCA2)蛋白与中心体BRCA2相互作用蛋白(centromal BRCA2interacting protein,centrobin)间相互作用及其细胞定位的关系,探讨二者功能上的联系,本研究采用哺乳细胞双杂交实验检测体内结合并初步判定BRCA2分子上的结合区域;免疫共沉淀实验进一步验证其体内结合活性,GST-pulldown法检测其体外结合活性,免疫组织化学染色观测BRCA2蛋白的细胞定位及在有丝分裂各期centrobin的细胞定位.结果显示,BRCA2与centrobin间存在体内和体外结合,且BRCA2分子的结合区域主要位于2393~2952氨基酸残基处;外源表达BRCA2定位于中心体,在有丝分裂各时相centrobin均定位于中心体.BRCA2与centrobin在体内形成复合物,并存在直接物理结合作用,二者存在细胞空间定位的一致性.该结果为进一步研究BRCA2在中心体复制中的调控作用提供了线索.

• 单位
  海南医学院; 第四军医大学; 唐都医院