miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用

作者：田文融; 左俊; 余扬; 齐郁松; 艾江; 卜盼盼; 赵皎均; 马志伟; 李培培; 马少林

来源：中国组织工程研究, 2022, 1-7.

• miR-2116-3p
• Ⅰ型胶原
• 增生性瘢痕
• 成纤维细胞
• 皮肤纤维化

背景：目前多项研究证实了miRNA影响增生性瘢痕的发生发展，Ⅰ型胶原与增生性瘢痕成纤维细胞密切相关，猜测miR-2116-3p也有可能与增生性瘢痕的发生发展有关系。目的：探讨miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用。方法：收集新疆医科大学第一附属医院6例患者的增生性瘢痕组织与6例患者重睑术后正常皮肤组织，采用qRT-PCR法检测miR-2116-3p与Ⅰ型胶原的表达。取增生性瘢痕组织，原代培养第3-6代成纤维细胞，分为阴性对照组、miR-2116-3p模拟物组和miR-2116-3p抑制物组，分别转染对应的序列，用CCK-8法与EdU试剂盒检测细胞增殖活力，划痕实验检测细胞迁移能力，流式细胞术检测细胞凋亡，qRT-PCR法与Western blot法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α平滑肌肌动蛋白的基因与蛋白表达，双荧光素酶实验验证其靶向结合。结果与结论：（1）增生性瘢痕组织中miR-2116-3p的mRNA表达量低于正常皮肤组织（P ＜0.01），Ⅰ型胶原的mRNA表达量低于正常皮肤组织（P ＜0.01）；（2）转染后24,48,72 h，与阴性对照组比较，miR-2116-3p模拟物组细胞活力降低（P ＜0.05或P ＜0.01）,miR-2116-3p抑制物组细胞活力升高（P ＜0.05或P ＜0.01）；转染后48 h，与阴性对照组比较，miR-2116-3p模拟物组细胞EdU标记数减少（P ＜0.01）,miR-2116-3p抑制物组EdU标记数增加（P ＜0.05）；（3）转染后24 h，与阴性对照组比较，miR-2116-3p模拟物组细胞划痕面积、细胞凋亡率增加（P ＜0.01）,miR-2116-3p抑制物组细胞划痕面积、细胞凋亡率减少（P＜0.01或P＜0.05）；（4）转染后24h，与阴性对照组比较，miR-2116-3p模拟物组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白的基因与蛋白表达下降（P ＜0.05或P ＜0.01）,miR-2116-3p抑制物组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达升高（P ＜0.01）；（5）双荧光素酶实验显示，miR-2116-3p能够与Ⅰ型胶原靶向结合；（6）结果表明，人增生性瘢痕中miR-2116-3p表达下调，miR-2116-3p可能通过靶向抑制Ⅰ型胶原的表达抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖、迁移，促进其凋亡。

• 单位
  新疆医科大学第一附属医院