阻断PAK1激酶活性对急性巨核细胞白血病细胞分化及凋亡的影响

作者：王淑瑾; 王春晴; 胡雪婷; 于翔茹; 付春玲^*

来源：中华血液学杂志, 2022, 43(06): 499-505.

• 白血病, 巨核细胞, 急性
• PAK1抑制剂
• 生长停滞
• 多倍化
• 细胞凋亡

目的探讨阻断p21蛋白激活激酶1(P21 Activated Kinase 1, PAK1)活性对急性巨核细胞白血病(AMKL)细胞株(CHRF和CMK)增殖、分化和细胞凋亡的影响。方法采用细胞计数法检测PAK1抑制剂(IPA-3和G5555)作用前后AMKL细胞增殖及集落形成能力;应用流式细胞术检测PAK1抑制剂对AMKL细胞周期的影响;Western blot法检测细胞周期蛋白cyclin D1和细胞凋亡相关蛋白Cleaved caspase 3的表达;使用慢病毒介导的shRNA转染技术干扰AMKL细胞中PAK1的蛋白表达水平, 应用流式细胞术检测敲低PAK1激酶的活性对AMKL细胞中多倍体DNA形成能力和细胞凋亡的影响。结果 PAK1抑制剂以剂量依赖性的方式抑制AMKL细胞的增殖并降低细胞集落形成能力, 与对照组相比差异均有统计学意义(P值均<0.05);PAK1抑制剂降低了S期AMKL细胞的百分比, Western blot法检测显示磷酸化PAK1及cyclin D1的表达水平显著下降(P值均<0.05);PAK1抑制剂通过上调Cleaved caspase 3表达诱导AMKL细胞凋亡;PAK1抑制剂IPA-3和G5555分别显示出不同的增加巨核细胞中多倍体DNA含量的能力, 仅有高浓度的IPA-3及低浓度的G5555可增加多倍体的巨核细胞的数目;敲低PAK1激酶活性, CHRF细胞多倍体DNA含量从14%增至22%, CMK细胞从8%增至16%, 凋亡比例分别增至16%和12%(P<0.05)。结论 PAK1抑制剂显著诱导AMKL细胞生长停滞并促进AMKL细胞凋亡;敲低PAK1的表达促进多倍体DNA的形成并诱导AMKL细胞凋亡。抑制PAK1的活性可能是控制AMKL的有效方法。

• 单位
  徐州医科大学