电穿孔法介导质粒DNA转化大肠杆菌XL1-Blue MRF′菌株的实验研究

作者：王**; 钱桂生; 李玉英; 谭红梅; 黄桂君; 安晓静

来源：四川医学, 2008, (02): 134-137.

• 电穿孔法
• 质粒DNA
• 转化
• 大肠杆菌XL1-BlueMRF&prime
• electroporation
• plasmid DNA
• transformation
• E.coli XL1-Blue MRF&prime

目的探讨电穿孔法介导质粒DNA转化大肠杆菌XL1-Blue MRF′的最佳条件,提高其转化效率。方法将pCMV-Scrip质粒转化大肠杆菌XL1-Blue MRF′菌株,观察不同的电转化条件对转化效率的影响。结果电场强度、脉冲时间、电击缓冲液的离子强度、细菌生长状态、感受态细胞保存时间、质粒DNA浓度对转化效率均有不同程度的影响;在电压2.0kV,电阻200Ω,电容25μF,脉冲时间4.3ms和低离子强度电击缓冲液的条件下转化,能获得较高的转化率。结论优化电穿孔条件能提高转化效率。

• 单位
  新桥医院