精氨酸代谢调控蛋白ArgR调控嗜热链球菌胞外多糖合成

作者：潘晖; 刘欣欣; 孔令慧; 夏永军; 印伯星; 艾连中; 熊智强^*

来源：微生物学报, 2020, 60(11): 2412-2422.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20190630

• 嗜热链球菌
• ArgR
• 胞外多糖生物合成
• 转录调控

【目的】研究精氨酸代谢调控蛋白ArgR对嗜热链球菌胞外多糖(EPS)合成的调控作用。【方法】利用大肠杆菌异源表达嗜热链球菌ArgR蛋白,通过尿素变性-复性和Ni2+亲和层析纯化。采用凝胶电泳迁移(EMSA)和生物膜层干涉(BLI)分析ArgR和eps基因簇中PepsA启动子的相互作用和动力学信息。构建过表达和弱化argR基因菌株,利用苯酚-硫酸法测定其合成EPS差异。【结果】大肠杆菌异源表达的ArgR为包涵体,使用尿素变性-复性纯化可获得2.95 mg/mL可溶性蛋白;EMSA和BLI结果显示ArgR和启动子PepsA有特异性结合,且结合因解离水平低而稳定;过表达argR基因可显著降低嗜热链球菌EPS合成,而弱化argR基因则提高EPS合成。【结论】本研究表明ArgR能特异性结合嗜热链球菌eps基因簇启动子,并负调控EPS生物合成。

• 单位
  上海理工大学