微小RNA-181对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及分子机制

作者：丁帅; 张广泉; 高延征; 陈书连; 曹臣

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(01).

• 骨肉瘤
• 微小RNA-181
• MAP3K10
• 增殖
• 凋亡

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-181对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法定量聚合酶链反应(qPCR)检测人骨肉瘤组织和对应的正常组织、正常成骨细胞NHOst和人骨肉瘤细胞株中miR-181表达水平。miR-181模拟物及NC-miRNA转染MG63或U20S细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)测定细胞增殖;细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成能力变化;细胞流式术检测细胞分布情况;Western blot检测MAP3K10表达水平;生物信息学软件TargetScan预测miR-181的靶作用位点,并通过荧光素酶活性实验证实miR-181的靶作用位点。结果与人正常组织比较,骨肉瘤组织中miR-181表达下降(t正常组织=5.487,P正常组织=0.009),与成骨细胞NHOst比较,MG63、Saos2、U20S和HOS骨肉瘤细胞中miR-181表达也显著下降(tMC63=0.489,PMC63=0.000;tSuos2=0.548,PSaos2=0.005;tu2os)=0.431,PU2os=0.000;tHOS=0.392,PHOS=0.009);CCK-8检测细胞增殖结果表明,与NC-miRNA转染组比较,miR-181转染组骨肉瘤细胞增殖速率显著下降,差异有统计学意义(tMG63=0.469,PMC63=0.007;tU2OS=0.372,PU2OS=0.000);MG63细胞迁移及侵染实验结果表明,与NC-miRNA转染组比较,miR-181显著抑制骨肉瘤细胞迁移与侵染比例(迁移:tMG63=0.541,PMG63=0.006;侵染:tMG63=0.473,PMG63=0.001);MAP3K10是miR-181的直接靶位点。结论miR-181通过靶向MAP3K10信号通路抑制骨肉瘤细胞MG63和U20S增殖并促进其凋亡。

• 单位
  河南省人民医院