miR-497通过靶向调节YAP1表达对甲状腺乳头状癌细胞生物学行为的影响

作者：刘九洲; 任莎莎; 付利军; 李洪婷; 李利文; 邱新光^*

来源：中华内分泌外科杂志, 2021, 15(01).

• 甲状腺乳头状癌
• miR-497
• Yes相关蛋白1
• 细胞生物学行为

目的探讨miR-497通过靶向调节Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1, YAP1)表达对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)细胞生物学行为的影响。方法将人PTC细胞株TPC-1细胞分为对照组、miR-497组、si-YAP1组和miR-497+si-YAP1组, 采用LipofectamineTM3000脂质体转染, 荧光素酶报告实验验证miR-497和YAP1靶向关系。MTT法检测各组细胞增殖活性, 流式细胞仪分析细胞凋亡率, Transwell检测侵袭细胞数, 划痕实验检测细胞迁移率。Western blot检测细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和活化的半胱天冬酶3(cleaved Caspase-3)表达。采用SPSS 22.0分析数据, 正态分布计量资料以均数±标准差(±s)表示, 多组间比较采用单因素方差分析, 两两组间比较采用SNK-q。结果与对照组比, miR-497组和si-YAP1组细胞YAP1 mRNA和蛋白表达下降(q=14.682、14.597, 23.743、23.571;P<0.05), 细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降(q=4.724、4.568、3.841, 4.216、3.952、3.274;P<0.05), 凋亡率升高(q=3.783、4.336, P<0.05), CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降(q=5.823、5.981、6.036、6.485, 5.934、6.110、6.573、6.614;P<0.05), TIMP-1蛋白表达升高(q=6.071、6.148, P<0.05);与si-YAP1组相比, miR-497+si-YAP1组细胞miR-497水平升高(q=14.726, P<0.05), YAP1 mRNA和蛋白表达下降(q=3.089、3.126, P<0.05), 细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降(q=2.654、2.537、2.246, P<0.05), 凋亡率升高(q=2.875, P<0.05), CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降(q=4.371、4.365、4.383、4.368, P<0.05), TIMP-1蛋白表达升高(q=4.275, P<0.05)。结论 miR-497可靶向负调控YAP1表达, 抑制TPC-1细胞增殖、侵袭和迁移。

• 单位
  郑州大学第一附属医院; 郑州大学