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摘要
目的构建蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin的原核表达载体,并诱导其表达重组Agkihpin,为将来量产Agkihpin提供方法和依据。方法 RT-PCR法扩增Agkihpin基因,构建重组表达质粒p ET30a(+)-Agkihpin和p EASY-E1-His6-Agkihpin,并转化到BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,SDS-PAGE电泳观察重组蛋白Agkihpin的表达情况,Western blot检测其特异性。结果成功构建Agkihpin的原核表达载体p EASY-E1-His6-Agkihpin和p ET30a(+)-His6-Agkihpin,并利用p EASY-E1-His6-Agkihpin首次在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出分子量约为30k D的His6-Agkihpin重组融合蛋白。结论首次实现了His6-Agkihpin重组融合蛋白在原核系统中的高效表达,为Agkihpin将来量产提供了方法和实验依据。
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单位广西医科大学; 广西医科大学附属肿瘤医院
