摘要
目的 探究射干麻黄汤对卵清蛋白(OVA)诱导的哮喘大鼠气道炎症的防治作用及机制。方法 将105只SPF雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,地塞米松组,桂龙咳喘宁组,射干麻黄汤高、中、低剂量组,每组15只。以卵清蛋白联合氢氧化铝复制大鼠哮喘模型,造模21 d后,正常组、模型组每天给予等体积的0.9%氯化钠溶液灌服,地塞米松组按0.405 mg/(kg·d)灌胃给药,桂龙咳喘宁按0.405 g/(kg·d)灌胃给药,射干麻黄汤高、中、低剂量组按12.96、6.48、3.24 g/(kg·d)灌胃给药。灌胃4周后,在末次OVA激发后2 h内解剖大鼠并取出肺组织、支气管肺泡灌洗液(BALF)。苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织的形态学变化及炎症细胞浸润;酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法测量BALF中白细胞介素(IL)-4、IL-5和肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量以及OVA特异性免疫球蛋白E(IgE)的浓度;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肺组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)、核因子kappa B(NF-κB)p65和蛋白表达水平;反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测SIRT1、NF-κB p65mRNA的表达水平。结果 HE染色发现各治疗组支气管壁损伤明显改善,炎性细胞浸润减少;ELISA结果显示,与正常组比较,模型组的各项炎性因子IgE、IL-4、IL-5和TNF-α均显著升高(P<0.01);与模型组比较,各治疗组(射干麻黄汤组、地塞米松组、桂龙咳喘宁组)的IgE、IL-4、IL-5和TNF-α均明显降低(P<0.01);RT-qPCR结果显示,与正常组比较,模型组的SIRT1mRNA相对表达水平显著下降(P<0.01),而NF-κB p65mRNA相对表达则显著升高(P<0.01);与模型组比较,各治疗组的SIRT1mRNA均显著升高(P<0.01),而治疗组的NF-κB p65mRNA均显著下降(P<0.01);Western blot结果显示,与正常组比较,模型组的SIRT1相对表达水平显著下降(P<0.01),而NF-κB p65相对表达则显著升高(P<0.01);与模型组相比,各治疗组的SIRT1均显著升高(P<0.01),而NF-κB p65均显著下降(P<0.01)。结论 射干麻黄汤通过调节SIRT1-NF-κB信号通路改善OVA诱导的支气管哮喘大鼠气道炎症性损伤。
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