SARA低表达对Activin A/Smads环路活性的影响

作者：石晓花; 王姣琦^*; 刘洪雨; 董玥; 纪秋野; 崔杨; 何金婷; 莽靖; 徐忠信

来源：中国实验诊断学, 2019, 23(07): 1207-1210.

• SARA
• ActA/Smads
• Smad3
• shRNA

目的探讨下调Smad锚捉蛋白(SARA)表达对Activin A/Smads环路活性的影响。方法利用RNA干扰技术,设计靶向大鼠SARA基因的短发卡RNA(shRNA),瞬时转染激活素A(ActA)高表达的大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞。转染48h后倒置荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR、Western blot检测SARA基因的表达情况。对阳性转染组及阴性转染组细胞换液3h后,Western blot检测Smad3总蛋白及磷酸化蛋白的表达。结果靶向SARA基因的SARA-shRNA及对照NC-shRNA质粒的转染效率均超过70%。转染48h后,SARA基因转录及蛋白水平的表达显著降低。细胞换液3h后,与NC-shRNA组比较SARA-shRNA组Smad3总蛋白及磷酸化蛋白下调44%和57%。结论 SARA基因低表达下调ActA/Smads环路活性。

• 单位
  吉林大学中日联谊医院; 吉林大学