基于数字PCR技术的Y染色体微缺失检测方法开发

作者:袁通阔; 张红国; 尹焕才; 刘睿智; 殷建*
来源:湖南师范大学自然科学学报, 2021, 44(01): 47-55.

摘要

为验证数字PCR(dPCR)技术在Y染色体微缺失检测中应用的可行性,以无精子区域(Azoospermia factor,AZF)中的AZFa,AZFb及AZFc为靶标,选择特异性引物并验证其有效性,通过退火温度优化去除可能的非特异性扩增,最终通过已知缺失类型的临床样本验证检测方法的灵敏度及准确性。优化后的dPCR方法检测样本的浓度可低至0.1 mg·L-1,该值远低于常规qPCR的检测限(1 mg·L-1),并能够准确反映Y染色体的缺失状况。因此dPCR可准确反映样本中的Y染色体微缺失状况,可开发成为男性不育症及其他生殖诊断中的重要技术。