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摘要
目的 构建以乳酸乳球菌(LL)为载体的日本血吸虫(Sj)rLL-Sj26GST疫苗，并研究其表达效率。方法 以pGEX-Sj26GST为模板PCR扩增Sj26GST基因片段，经XbaⅠ和HindⅢ双酶切后插入pMG36e,构建重组质粒pMG36e-Sj26GST,转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞。抽提质粒，经双酶切鉴定正确后电穿孔转化乳酸乳球菌MG1363株，构建日本血吸虫rLL-Sj26GST疫苗，抽提质粒进行PCR鉴定。结果 pMG36e-Sj26GST经双酶切获得预期大小的目的片段，重组质粒构建正确。提取具有罗红霉素抗性的rLL质粒进行PCR,扩增出676 bp的Sj26GST基因片段；SDS-PAGE分析显示rLL可表达26 ku的Sj26GST蛋白,表达蛋白约占菌体总蛋白的18%;Western blot检测表达蛋白可被Sj感染者血清识别。结论 成功构建日本血吸虫rLL-Sj26GST疫苗，表达的Sj26GST蛋白具有反应原性。
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单位重庆医科大学附属第一医院
