慢病毒介导基因转染人韧带成纤维细胞表达的研究

作者：刘锦愉; 韩创业; 赵春节; 陈首; 杨劲松

来源：广西医科大学学报, 2015, 32(01): 5-7.

DOI：10.16190/j.cnki.45-1211/r.2015.01.002

• 慢病毒载体
• 人韧带成纤维细胞
• 绿色荧光蛋白

目的:探讨慢病毒介导的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转染人韧带成纤维细胞的转染效率,以及转染GFP后是否对韧带成纤维细胞的生物活性产生影响,为下一步实验提供理论依据。方法:采用组织块贴壁法培养原代人韧带成纤维细胞,取P2代细胞进行慢病毒感染,96h后荧光显微镜观察转染效率,流式细胞术(FACS)检测细胞凋亡和细胞增殖,及MTT法检测细胞转染前后的生物学活性变化。结果:成功建立人韧带成纤维细胞培养模型,荧光显微镜GFP阳性细胞率为95%;FACS检测结果显示未转染组与稳定转染组细胞凋亡率分别为(1.91±0.13)%和(1.96±0.12)%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);MTT结果显示转染前后细胞生物学活性无显著影响(P>0.05)。结论:慢病毒介导的GFP基因能高效稳定转染人韧带成纤维细胞,同时并不影响其生物学活性,能满足后续实验的需要。

• 单位
  广西医科大学第一附属医院