CXCL12对RANKL诱导的RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响

作者：赖宪良; 苏嘉; 陈鸥

来源：温州医科大学学报, 2018, 48(03): 216-224.

• 基质衍生因子-1
• RAW264.7细胞
• 破骨细胞
• 骨质疏松

目的:研究基质衍生因子-1(CXCL12)体外对核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导小鼠单核细胞RAW264.7向破骨细胞分化的影响。方法:体外培养RAW264.7细胞,使用RANKL诱导细胞分化为破骨细胞,同时使用浓度为0、25、50、100ng/m L的CXCL12刺激细胞,CCK-8检测CXCL12对细胞增殖活性的影响,实验分为对照组、CXCL12组和AMD3100组,对照组只使用RANKL诱导培养,CXCL12组同时使用50ng/m L的CXCL12培养,AMD3100组同时使用浓度为650nmol/L的AMD3100刺激细胞。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法观察TRAP染色阳性破骨细胞的形态,RT-PCR检测MMP-9、c-src、CathepsinKm RNA的表达情况,Westernblot检测MMP-9、p-src、CathepsinK蛋白的表达情况。结果:CXCL12不影响RAW264.7细胞的增殖活性;RANKL诱导的细胞TRAP染色阳性的数量在CXCL12组明显增高(P<0.05),而AMD3100组明显降低(P<0.05);CXCL12能够促进RANKL诱导的细胞中MMP-9、c-src、CathepsinKm RNA的表达(P<0.05)及MMP-9、p-src、CathepsinK蛋白的表达(P<0.05);AMD3100则能抑制这种增高(P<0.05)。结论:CXCL12能促进RANKL诱导的RAW264.7细胞向破骨细胞分化,并能提高细胞的骨吸收能力,可能是骨质疏松的治疗靶点。

• 单位
  温州市中西医结合医院