稳定转染DMBT1对胆囊癌细胞株GBC-SD糖链表达的影响及机制

作者：张玲; 贺涛; 黄长山; 王云检; 黄涛; 韩风

来源：中华实验外科杂志, 2011, (11): 1844-1846.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2011.11.009

• 脑恶性肿瘤缺失基因1
• 胆囊癌
• 糖链

目的应用已建立的稳定表达候选抑癌基因DMBT1的胆囊癌细胞株GBC-SD,探讨转染前后细胞糖链的变化及其机制。方法针对已成功建立的稳定表达DMBT1的胆囊癌细胞株GBC-SD,细胞分组:GBC-SD/DMBT1,转染DMBT1组;GBC-SD/Vector,转染空载体组;GBC-SD,未处理组;标记2种凝集素探针,即蔓陀萝凝集素(DSA)、刀豆素A(ConA),检测转染前后细胞表达糖链类型变化;采用流式细胞仪检测生物素标记的两种凝集素DSA与ConA在细胞表面的结合;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹进一步检测N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V(GnT-V)表达。结果凝集素探针实验及生物素标记表明实验组多表达ConA结合型糖链,对照组多表达DSA结合型糖链;RT-PCR及免疫印迹进一步发现实验组表达GnT-V相对灰度值分别为0.32,0.47,显著低于对照组(0.62,0.75),差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 DMBT1在体外过表达促进胆囊癌细胞由表达3、4天线、偏2天线转而向2天线型转变,至少部分依赖于GnT-V活性的降低。

• 单位
  郑州大学