中华鳖MHC Ⅱα基因cDNA的克隆及组织表达分析

作者:童正飞; 葛玲瑞*; 胡亚洲; 杨涛; 涂开发; 王佩; 周先文; 王晓清*; 熊钢
来源:渔业科学进展, 2021, 42(06): 102-108.
DOI:10.19663/j.issn2095-9869.20200802001

摘要

为了探究中华鳖(Pelodiscus sinensis)的主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)的结构和功能,本研究利用RACE技术成功克隆获得中华鳖MHC Ⅱα基因的cDNA全长序列,其长度为1296 bp,开放阅读框(ORF)为807 bp,共编码268个氨基酸,分为信号肽序列、Ⅱ类组织相容性抗原α结构域、IGcl结构域及跨膜结构域4个功能结构域。通过NJ法构建的系统进化树分析显示,中华鳖与西部锦龟(Chrysemys picta bellii)亲缘较近,而与哺乳类、鸟类及鱼类亲缘关系较远。荧光定量PCR结果显示,MHC Ⅱα mRNA在中华鳖8个组织中均有表达,在脾、心、肝及肠组织中表达水平较高,在肌肉组织中表达量最低。感染嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)12 h后,中华鳖MHC ⅡαmRNA在肝和肠组织中的表达显著上调;感染1d时,在脾组织中的表达显著上调;感染1d及5 d时,在肾组织中的表达显著上调。研究表明,中华鳖MHC Ⅱα基因参与了中华鳖免疫反应。

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