miR-183通过靶向MRTF-A抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间充质转化

作者：张雅敏; 刘金鹏; 万伟; 王甲林^*

来源：山西医科大学学报, 2023, 54(03): 313-321.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2023.03.006

• miR-183
• MRTF-A
• EMT
• 细胞迁移
• 细胞侵袭

目的 探讨miR-183通过靶向肌醇相关转录因子A(myo-inositol-related transcription factor A,MRTF-A)对乳腺癌细胞增殖和上皮间质转化的影响。方法 收集本院收治的20例乳腺癌确诊患者的乳腺癌组织和癌旁正常组织，通过实时定量PCR检测miR-183的表达水平。MCF-7细胞分为4组：NC组、miR-con组、miR-183 mimics组和miR-183 inhibitor组。NC组MCF-7细胞不做转染处理，miR-con组、miR-183 mimics组和miR-183 inhibitor组MCF-7细胞分别转染空质粒、miR-183模拟物和miR-183抑制剂。通过实时定量PCR检测miR-183和MRTF-A的mRNA表达水平；采用CCK-8法检测细胞增殖水平；采用Transwell实验分析细胞迁移和侵袭情况；采用蛋白质印迹实验检测N-cadherin、Vimentin和E-cadherin蛋白表达水平。将si-MRTF-A序列插入到报告基因质粒(pRL-TK)中，构建重组pRL-TK-si-MRTF-A质粒，然后将实验分为3组：MRTF-A-NC组、MRTF-A-con组和si-MRTF-A组。MRTF-A-NC组MCF-7细胞不做转染处理，MRTF-A-con组和si-MRTF-A组MCF-7细胞分别转染pRL-TK空质粒和pRL-TK-si-MRTF-A质粒。采用CCK-8法检测细胞增殖水平；采用Transwell实验分析细胞迁移和侵袭情况；采用蛋白质印迹实验检测N-cadherin、Vimentin和E-cadherin蛋白表达水平；通过荧光素酶报告基因检测分析目标基因的靶向关系。结果 与癌旁正常组织相比，乳腺癌组织中miR-183的表达水平降低(P<0.01)。与miR-con组或NC组相比，miR-183 mimics组MCF-7细胞中miR-183表达水平升高(P<0.01),N-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平和MCF-7细胞的增殖水平均降低(P<0.01);miR-183 inhibitor组MCF-7细胞中miR-183表达水平降低(P<0.01),N-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平和MCF-7细胞的增殖水平均升高(P<0.01)。与miR-con组或NC组相比，miR-183 mimics组MCF-7细胞迁移和侵袭水平均降低(P<0.01);miR-183 inhibitor组MCF-7细胞迁移水平和侵袭水平均升高(P<0.01)。双荧光素酶报告基因检测证实MRTF-A是miR-183的靶标。与MRTF-A-con组或MRTF-A-NC组相比，si-MRTF-A组MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭水平均降低(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.01)。结论 miR-183通过靶向MRTF-A在乳腺癌细胞增殖、上皮间质转化和转移中发挥重要作用，是治疗乳腺癌的潜在靶点。

• 单位
  西安医学院第一附属医院