丙戊酸和2-己基-4-戊炔酸对乳腺癌易感基因2失活的成纤维细胞放射增敏作用及其机制

作者：韩永涛; 蔡祖超; 凤志慧^*

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2023, 37(09): 695-702.

• 丙戊酸
• 2-己基-4-戊炔酸
• 放射增敏
• DNA损伤
• 乳腺癌易感基因2

目的 研究丙戊酸(VPA)及其衍生物2-己基-4-戊炔酸(HPTA)对乳腺癌易感基因2(BRCA2)失活的成纤维细胞放射敏感性的影响及其机制。方法 取生长良好BRCA2双等位基因失活的EUFA423成纤维细胞，实验分组：(1)电离辐射(IR)0(细胞对照)，2,4和6 Gy组，VPA+IR 0,2,4和6 Gy组(VPA 500μmol·L-1预处理24 h后进行IR)和HPTA+IR 0,2,4和6 Gy组(HPTA 15μmol·L-1预处理24 h后进行IR)；(2)细胞对照、VPA、HPTA、IR对照、VPA+IR和HPTA+IR组，除IR剂量为8 Gy外，其他处理同(1)。细胞克隆形成实验检测细胞增殖能力；中性和碱性彗星实验检测细胞核拖尾尾距，并计算DNA双链断裂(DSB)百分率；细胞免疫荧光实验和Western印迹法分别检测磷酸化组蛋白(γH2AX)、53BP1、重组酶Rad51和BRCA1蛋白焦点阳性细胞百分率及其蛋白表达。结果 细胞克隆形成实验结果显示，给予EUFA423细胞IR 2,4和6 Gy处理后，与同剂量IR对照组比较，VPA+IR和HPTA+IR组细胞克隆形成率均显著降低(P<0.05,P<0.01)。中性和碱性彗星实验结果均显示，与同时间IR对照组比较，IR 8 Gy处理后0,30和60 min VPA+IR和HPTA+IR组细胞核拖尾尾距均明显增加，DNA DSB百分率明显增加(P<0.01)。细胞免疫荧光实验和Western印迹法结果显示，IR 8 Gy处理后6 h,VPA+IR和HPTA+IR组γH2AX和53BP1焦点阳性细胞百分率及γH2AX和53BP1蛋白表达水平与IR对照组比较明显增加(P<0.01),BRCA1和Rad51焦点阳性细胞百分率及BRCA1和Rad51蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。上述指标VPA+IR和HPTA+IR组之间均无显著差异。结论 VPA和HPTA对BRCA2失活的EUFA423细胞具有放射增敏作用，VPA 500μmol·L-1和HPTA15μmol·L-1对细胞放射增敏作用相似。

• 单位
  公共卫生学院; 浙江大学医学院附属口腔医院; 山东大学