人糖基磷脂酰肌醇(GPI)-B7-1真核表达载体的构建及表达

作者：熊茂林; 宋畅; 罗荣城; 罗超权; 李民友; 李秀英; 朱振宇

来源：中国病理生理杂志, 2005, (01): 156-160.

• 糖基磷脂酰肌醇类
• 基因
• B7-1
• CHO细胞
• 真核表达
• 印迹法
• 蛋白质 Glycosylphosphatidylinositols
• Genes
• BT-1
• CHO cells
• Eukaryotic expression
• Blotting
• Western

目的在仓鼠卵巢细胞CHO细胞中高效表达糖基磷脂酰肌醇GPI-B7-1(B7-1即CD80)融合蛋白,获得大量融合蛋白以研究GPI-B7-1在肿瘤治疗中的应用潜力。方法构建真核表达载体pc31/GPI-B7-1,利用脂质体lipofectamine2000将其转染CHO细胞,G418加压筛选抗性克隆,流式细胞仪检测细胞膜上GPI-B7-1融合蛋白的表达情况,SDS-PAGE、Westernblot分析鉴定其免疫活性。结果真核表达载体转染CHO细胞经G418筛选后,流式细胞分析证实为GPI锚定蛋白,SDS-PAGE在60kD左右蛋白表达量明显高于对照组,在Westernblot在60kD左右有一条...

• 单位
  中山大学; 南方医科大学; 南方医院